Noi soi tieu hoa can su dung nhung phuong tien tot nhat
Luật này áp dụng đối với tăng trưởng phi neo độc lập của các tế bào, chẳng hạn như tế bào gốc tạo máu, các dòng tế bào khối u, các dòng tế bào biến đổi. Giải pháp thạch mà không cần sử dụng các đặc tính kết dính có thể được củng cố, các tế bào nội soi tiêu hóa khối u đã được trộn với một môi trường thạch, thạch là các tế bào khối u đã kiên cố được đặt ở một vị trí nhất định, thạch xung quanh các tế bào khối u có thể được để làm cho đầy đủ các phong trào và do đó có thể được sử dụng để phát hiện ung thư tế bào di động đang hoạt động. Khối u tế bào trong một môi trường thích hợp, chúng có thể sinh sôi nảy nở và do đó có thể đo được khối u tỷ lệ hình thành tế bào thuộc địa. Hệ thống tạo máu cùng một phương pháp mềm agar thuộc địa hình khảo nghiệm, chủ yếu nghiên cứu về phân chia tế bào, nhưng sử dụng một phương tiện khác nhau.
(1) trên (1) đến (3) bước.
(2) để điều chỉnh mật độ treo tế bào 1 × 103 tế bào / ml tế bào.
(3) để chuẩn bị một underlayer agar, agarose tan hoàn toàn trong 5% và khoảng 37 ℃prewarmed môi trường nuôi cấy hoàn toàn mới mẻ trong một tỉ lệ 1: 9 ở 40 ℃đều hỗn hợp, thêm vào các đĩa Petri (đường kính 60mm), mỗi một món ăn có chứa thạch 0,5% 2ml trung, thạch hoàn toàn đông đặc ở nhiệt độ phòng.
(4) Chuẩn bị thạch đầu, mất 37 ℃Gradient mật độ khác nhau (trong mỗi món ăn có chứa 50.100.200 a) của 1.5ml treo tế bào di chuyển vào một cốc thủy tinh nhỏ, thêm 40 ℃, 5% khối lượng hỗn hợp thạch, Phục vụ 0.25% bán kiên cố môi trường thạch. Với triệu chứng bệnh trĩ một nửa rắn môi trường thạch tốt đã được bổ sung ngay lập tức bao phủ với các món ăn petri thạch cơ bản của môi trường thạch đông đặc ở nhiệt độ phòng. 37 ℃, 5% CO2 được phép đứng trong 2-3 tuần.
(D) kết quả
1. Thường xuyên quan sát sự hình thành của các khuẩn lạc nuôi cấy tế bào.
2. Dưới kính hiển vi tính lớn hơn 50 tế bào dòng vô tính và tỷ lệ hình thành thuộc địa được tính như sau:
Tỷ lệ hình thành Colony (%) = (số khuẩn lạc / tế bào được cấy) × 100
(V) Ghi chú
1. Agar nhiệt và axit không bền, nếu lặp đi lặp lại làm nóng, dễ dàng phân hủy, độc hại, trong khi Agar độ cứng giảm. Vì vậy Agar Autoclave (10 £ 15 phút) được thực hiện theo một liều lượng pha chế.
2. Các dịch treo tế bào, phân tán tế bào> 95%.
3. thạch mềm, chú ý agar khi trộn với nhiệt độ di động không được vượt quá 40 ℃, như vậy là không để đốt các tế bào.
4. Mật độ tế bào cấy là không quá cao.
5. Các tế bào được nuôi cấy trong mật độ thấp, tỷ lệ sống sót đã được giảm đáng kể, dòng tế bào không giới hạn và các dòng tế bào khối u thuộc U sợi tuyến địa hình tỷ lệ chung là 10% hoặc nhiều hơn. Tuy nhiên, các tế bào nuôi cấy sơ cấp và dòng tế bào chỉ được giới hạn 0,5-5%, hoặc thậm chí bằng không. Để nâng cao tỷ lệ hình thành thuộc địa, nếu cần thiết, thêm insulin trong môi trường nuôi cấy, dexamethasone, thúc đẩy các chất thuộc địa hình thành tế bào.
VnVista I-Shine
© http://vnvista.com